血液基因组dna提取试剂盒又叫什么

2024-05-15

1. 血液基因组dna提取试剂盒又叫什么

血液基因组DNA提取试剂盒
操作步骤:
一、小体积全血操作步骤如下: <400ul全血,以300ul血液处理量为例
1、向300ul抗凝剂的血液中加入2.5倍体积的Solution A,颠倒混匀,12000rpm离心1分钟,弃掉上清。
2、再重复步骤1一次,弃掉上清。
3、按照第3页附表配制Solution B与Solution C的混合液(Solution B与Solution C的使用量见附表)。
4、加入150ul混合液,用移液器吹打均匀,60℃水浴或孵箱孵育10分钟,孵育期间颠倒混匀一次,溶液由红色变为黄绿色或棕色。 
5、加入等体积的异丙醇,充分颠倒混匀至出现丝状或絮状基因组DNA,12000prm离心1分钟,弃掉上清。
6、加入800ul 75%酒精,颠倒数次;12000prm离心1分钟,用移液器吸掉上清,室温干燥10~15分钟。
7、加入150ul Elution buffer,60℃孵育10~15分钟或过夜溶解DNA,用移液器吹打均匀,-20℃保存基因组DNA。
二、中量全血操作步骤如下: 1~10ml血量,以3ml血液处理量为例
1、向3ml抗凝剂的血液中加入2.5倍体积的Solution A,颠倒混匀,3000rpm离心5分钟,弃掉上清。
2、再重复步骤1一次,弃掉上清。
3、按照第3页附表配制Solution B与Solution C的混合液(Solution B与Solution C的使用量见附表)。
4、加入1.5ml混合液,用1ml移液器或者一次性塑料吸管吹打均匀,60℃水浴或孵箱孵育10分钟,孵育期间颠倒混匀一次,溶液由红色变为黄绿色或棕色。 
5、加入等体积的异丙醇,充分颠倒混匀至出现丝状或絮状基因组DNA。
6、用移液器将絮状物移到加有800ul 75%酒精的1.5ml EP管中,颠倒数次,12000prm离心3分钟,弃掉上清,室温干燥10~15分钟。
7、加入500ul Elution buffer,60℃孵育10~15分钟或过夜溶解DNA,用移液器吹打均匀,-20℃保存基因组DNA。
三、大量全血操作步骤如下: 10~20ml血量,以10ml血液处理量为例
1、向10ml抗凝剂的血液中加入2.5倍体积的Solution A,颠倒混匀,8000rpm离心5分钟,弃掉上清;
2、再重复步骤1一次,弃掉上清。
3、按照第3页附表配制Solution B与Solution C的混合液(Solution B与Solution C的使用量见附表);
4、加入5ml混合液,用一次性塑料吸管吹打均匀,60°C水浴或孵箱孵育10分钟,孵育期间颠倒混匀一次,溶液由红色变为黄绿色或棕色。 
5、加入等体积的异丙醇,充分颠倒混匀至出现丝状或絮状基因组DNA;
6、用移液器将絮状物移到加有800ul 75%酒精的1.5ml EP管中,颠倒数次,12000prm离心1分钟,弃掉上清,室温干燥10~15分钟;
7、加入1000ul Elution buffer,60℃孵育10~15分钟或过夜溶解DNA,用移液器或一次性塑料吸管吹打均匀,-20℃保存基因组DNA。

血液基因组dna提取试剂盒又叫什么

2. 全血基因组DNA提取试剂盒的作用原理是怎样的

您好!全血可提取出3-6μg,纯度达1.1.9,长度可达30Kb-50kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应.从十几个配方中优选出的红细胞裂解液配方,裂解快速完全,客户可根据需要选择购买.说明书中针对实验过程出现的疑难做出了详细的解答,帮助你解决实验过程中遇到的问题(如标本中含有血凝块、红细胞裂解不完全、DNA产量低、DNA下游酶切不能切开或者酶切不完全、DNA长度小于15kb、A260吸光值异常偏高、洗脱下来的DNA溶液还带有轻微的颜色等).【摘要】
全血基因组DNA提取试剂盒的作用原理是怎样的【提问】
您好!以下是您需要的信息
全血基因组DNA提取试剂盒作用原理:全血基因组DNA提取试剂盒特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,提取全血基因组DNA。 离心吸附柱中采用的硅基质材料为新型材料,能够高效、专一吸附DNA,可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。【回答】
Ezup柱式血液基因组DNA抽提试剂盒中各试剂的作用【提问】
您好!全血可提取出3-6μg,纯度达1.1.9,长度可达30Kb-50kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应.从十几个配方中优选出的红细胞裂解液配方,裂解快速完全,客户可根据需要选择购买.说明书中针对实验过程出现的疑难做出了详细的解答,帮助你解决实验过程中遇到的问题(如标本中含有血凝块、红细胞裂解不完全、DNA产量低、DNA下游酶切不能切开或者酶切不完全、DNA长度小于15kb、A260吸光值异常偏高、洗脱下来的DNA溶液还带有轻微的颜色等).【回答】

3. 全血DNA提取试剂盒哪个公司最好?

效果好的话当然是promega或者omega的,不过会贵很多 都是美国佬的东西
便宜点的就是国产的tiangen,效果会差一点点 如果是大样本的全血 用这个也凑合

全血DNA提取试剂盒哪个公司最好?

4. 全血基因组DNA提取试剂盒的作用原理是怎样的

全血基因组DNA提取试剂盒(吸附柱法)
本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,提取全血基因组DNA。 离心吸附柱中采用的硅基质材料,能够高效、专一吸附DNA,可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。 提取的基因组DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠。使用全血基因组DNA提取试剂盒(吸附柱法)提取的基因组DNA可用于各种常规操作,包括酶切、 PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
操作步骤: 
使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
样品的处理(本产品适用于处理新鲜的或已经添加抗凝剂的 0.lml-1ml 血液样品):a、在血液样品中加入 2-3 倍体积的红细胞裂解液,充分颠倒混匀,12000rpm 离心 1min,小心吸去上清,沉淀应为白色或淡红色,如果裂解不彻底,可重复以上述步骤一次。向沉淀中加 200ul 溶液 YA,振荡至彻底混匀。b、 如果处理的血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的血液,其红细胞为有核细胞,因此处理量为 5-20u1,不需要再用红细胞裂解液处理,直接加 200ul 溶液 YA,振荡至彻底混匀。
向悬浮液中加入 20ul 的 RNase A (10mg/ml),充分颠倒混匀,室温放置 10min。
加入 20ul 的蛋白酶 K( 10mg /ml ),充分颠倒混匀,65℃水浴消化 30-60min,消化期间可颠倒离心管混匀数次,直至样品消化完全为止。
加入 200ul 溶液 YB,再加入 200ul 无水乙醇,充分颠倒混匀,此时可能会出现絮状沉淀,不影响 DNA 的提取,可将溶液和絮状沉淀都加入吸附柱中,室温放置 2min。
12000rpm 离心 2min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
向吸附柱中加入 600ul 漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm 离心 1min,弃废液,将吸  附柱放入收集管中。
向吸附柱中加入 600ul 漂洗液,12000rpm 离心 1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
12000rpm 离心 2min,将吸附柱敞口置于室温或 50℃温箱放置数分钟,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,否则漂洗液中的乙醇会影响后续的实验如酶切、PCR 等。
将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加 50-200ul 经 65℃水浴预热的洗脱液,室温放置5min,12000rpm 离心 1min。
离心所得洗脱液可再加入吸附柱中,12000rpm 离心 2min,即可得到高质量的基因组 DNA。

注意事项:
本试剂盒置于室温( 15 -25℃) 干燥条件下可保存12个月,更长时间的保存可置于2 -8℃。
常用的血液抗凝剂有EDTA、ACD和肝素等,需注意的是,如欲制备大分子量血液基因组DNA,可优先考虑使用ACD抗凝。一般不使用肝素抗凝,因为用肝素抗凝的血液提取的基因组DNA进行PCR扩增时,有PCR扩增抑制现象。
样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
如果试剂盒中的溶液出现沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,不影响效果。
绝大多数哺乳动物全血中的红细胞无核,故在提取基因组DNA时需去除不含DNA的无核红细胞,以免影响白细胞裂解和DNA释放。如果处理的血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的血液,其红细胞为有核细胞,因此处理量减少为5-20ul,不需要再用红细胞裂解液来裂解红细胞。
洗脱缓冲液的体积最好不少于50ul,体积过小会影响回收效率:洗脱液的pH值对洗脱效率也有影响;若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的pH值调至此范围),pH 值低于7.0会降低洗脱效率。

5. 全血基因组DNA提取试剂盒的作用原理是怎样的

全血基因组DNA提取试剂盒作用原理:
全血基因组DNA提取试剂盒特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,提取全血基因组DNA。 离心吸附柱中采用的硅基质材料为新型材料,能够高效、专一吸附DNA,可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。
全血基因组DNA提取试剂盒使用说明:
使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
样品的处理(本产品适用于处理新鲜的或已经添加抗凝剂的0.lmL-1mL血液样品):
a、在血液样品中加入2-3倍体积的红细胞裂解液,充分颠倒混匀,12000rpm离心1min,小心吸去上清,沉淀应为白色或淡红色,如果裂解不彻底,可重复以上述步骤一次。向沉淀中加200μL溶液YA,振荡至彻底混匀。
b、 如果处理的血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的血液,其红细胞为有核细胞,因此处理量为5-20μL,不需要再用红细胞裂解液处理,直接加200μL溶液YA,振荡至彻底混匀。
向悬浮液中加入20μL 的RNase A (10mg/mL),充分颠倒混匀,室温放置10min。
加入20μL的蛋白酶K( 10mg /mL ),充分颠倒混匀,65℃水浴消化30-60min,消化期间可颠倒离心管混匀数次,直至样品消化完全为止。
加入200μL溶液YB,再加入200μL无水乙醇,充分颠倒混匀,此时可能会出现絮状沉淀,不影响DNA的提取,可将溶液和絮状沉淀都加入吸附柱中,室温放置2min。
12000rpm离心2min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
向吸附柱中加入600μL漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
向吸附柱中加入600μL漂洗液,12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
12000rpm离心2min,将吸附柱敞口置于室温或50℃温箱放置数分钟,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,否则漂洗液中的乙醇会影响后续的实验如酶切、PCR等。
将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加50-200μL经65℃水浴预热的洗脱液,室温放置5min,12000rpm离心1min。
离心所得洗脱液可再加入吸附柱中,12000rpm离心2min,即可得到高质量的基因组DNA。
全血基因组DNA提取试剂盒注意事项:
本试剂盒置于室温( 15 -25℃) 干燥条件下可保存12个月,更长时间的保存可置于2 -8℃。
常用的血液抗凝剂有EDTA、ACD和肝素等,需注意的是,如欲制备大分子量血液基因组DNA,可优先考虑使用ACD抗凝。一般不使用肝素抗凝,因为用肝素抗凝的血液提取的基因组DNA进行PCR扩增时,有PCR扩增抑制现象。
样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
4、如果试剂盒中的溶液出现沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,不影响效果。
绝大多数哺乳动物全血中的红细胞无核,故在提取基因组DNA时需去除不含DNA的无核红细胞,以免影响白细胞裂解和DNA释放。如果处理的血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的血液,其红细胞为有核细胞,因此处理量减少为5-20μL,不需要再用红细胞裂解液来裂解红细胞。
洗脱缓冲液的体积最好不少于50μL,体积过小会影响回收效率:洗脱液的pH值对洗脱效率也有影响;若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的pH值调至此范围),pH 值低于7.0会降低洗脱效率。

全血基因组DNA提取试剂盒的作用原理是怎样的

6. TaKaRa是哪个国家的公司?提取DNA的试剂盒质量怎么样啊?

日本的。他们的试剂的优势是价格便宜,普通用用都是没有问题的
我用过他们的基因组DNA提取试剂盒,也用过质粒DNA提取试剂盒。效果都还可以,纯度较好,A260/280大都在1.8左右,浓度两三百ng/ul

7. 血液基因组DNA提取前为什么要先进行红细胞裂解

血液基因组DNA提取前为什么要先进行红细胞裂解
全血基因组DNA提取试剂盒作用原理:
全血基因组DNA提取试剂盒特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,提取全血基因组DNA。 离心吸附柱中采用的硅基质材料为新型材料,能够高效、专一吸附DNA,可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。
全血基因组DNA提取试剂盒使用说明:
使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
样品的处理(本产品适用于处理新鲜的或已经添加抗凝剂的0.lmL-1mL血液样品):
a、在血液样品中加入2-3倍体积的红细胞裂解液,充分颠倒混匀,12000rpm离心1min,小心吸去上清,沉淀应为白色或淡红色,如果裂解不彻底,可重复以上述步骤一次。向沉淀中加200μL溶液YA,振荡至彻底混匀。
b、 如果处理的血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的血液,其红细胞为有核细胞,因此处理量为5-20μL,不需要再用红细胞裂解液处理,直接加200μL溶液YA,振荡至彻底混匀。
向悬浮液中加入20μL 的RNase A (10mg/mL),充分颠倒混匀,室温放置10min。
加入20μL的蛋白酶K( 10mg /mL ),充分颠倒混匀,65℃水浴消化30-60min,消化期间可颠倒离心管混匀数次,直至样品消化完全为止。
加入200μL溶液YB,再加入200μL无水乙醇,充分颠倒混匀,此时可能会出现絮状沉淀,不影响DNA的提取,可将溶液和絮状沉淀都加入吸附柱中,室温放置2min。
12000rpm离心2min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
向吸附柱中加入600μL漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
向吸附柱中加入600μL漂洗液,12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
12000rpm离心2min,将吸附柱敞口置于室温或50℃温箱放置数分钟,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,否则漂洗液中的乙醇会影响后续的实验如酶切、PCR等。
将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加50-200μL经65℃水浴预热的洗脱液,室温放置5min,12000rpm离心1min。
离心所得洗脱液可再加入吸附柱中,12000rpm离心2min,即可得到高质量的基因组DNA。
全血基因组DNA提取试剂盒注意事项:
本试剂盒置于室温( 15 -25℃) 干燥条件下可保存12个月,更长时间的保存可置于2 -8℃。
常用的血液抗凝剂有EDTA、ACD和肝素等,需注意的是,如欲制备大分子量血液基因组DNA,可优先考虑使用ACD抗凝。一般不使用肝素抗凝,因为用肝素抗凝的血液提取的基因组DNA进行PCR扩增时,有PCR扩增抑制现象。
样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
4、如果试剂盒中的溶液出现沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,不影响效果。
绝大多数哺乳动物全血中的红细胞无核,故在提取基因组DNA时需去除不含DNA的无核红细胞,以免影响白细胞裂解和DNA释放。如果处理的血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的血液,其红细胞为有核细胞,因此处理量减少为5-20μL,不需要再用红细胞裂解液来裂解红细胞。
洗脱缓冲液的体积最好不少于50μL,体积过小会影响回收效率:洗脱液的pH值对洗脱效率也有影响;若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的pH值调至此范围),pH 值低于7.0会降低洗脱效率。

血液基因组DNA提取前为什么要先进行红细胞裂解

8. 国内有-常温全血基因组DNA提取试剂盒的吗?

有 ,血液DNA提取一般都需要经历热浴破裂细胞释放DNA,洗涤液洗去盐、脂等杂质,最后获得DNA,吉恩特(和谐)常温提取的盒子省去了加热环节,很好用。